A pesar de la probada eficacia de Bacillus thuringiensis (Bt) a los insectos, se han reportado ciertos casos de resistencia alrededor del mundo, especialmente para las poblaciones de Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae). Aunque el mecanismo de resistencia a las toxinas Bt, debido a la alteración de los receptores parece común entre los lepidópteros, pocos estudios han evaluado la respuesta inmune a las toxinas Bt en insectos resistentes. Así, este estudio tuvo como objetivo comparar el recuento total y diferencial de hemocitos tanto como los niveles de óxido nítrico en poblaciones de P. xylostella resistente y susceptible a Bt después de la exposición a las formulaciones comerciales de Dipel®PM (Btk) y Xentari®WDG (Bta). Insectos resistentes y susceptibles fueron expuestos a su CL50 correspondientes de Dipel or Xentari obtenidos a través de curvas dosis-respuesta. Muestras de hemolinfa fueron recogidas a las 1, 6 y 12 h después del tratamiento para el recuento total y diferencial de hemocitos y la cuantificación de los niveles de óxido nítrico. Dipel®PM causó una reducción significativa en el número total de hemocitos en las larvas de ambas poblaciones, mientras que Xentari afectó sólo la proporción de tipos de hemocitos. Ambas formulaciones interfirieron con los niveles de óxido nítrico, aunque no se observó diferencia entre las dos poblaciones.

Despite the proven efficiency of Bacillus thuringiensis (Bt) to insects, a number of resistance cases have been reported throughout the world particularly for Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) populations. Although the mechanism of resistance to Bt toxins due to altered receptors appears to be common among Lepidoptera, few studies have evaluated the immune response to Bt toxins in resistant insects. Thus, this study aimed to compare the total and differential counts of hemocytes as well as the nitric oxide levels in resistant and susceptible populations of P. xylostella to Bt after exposure to Dipel®PM (Btk) and Xentari®WDG(Bta) commercial formulations. Susceptible and resistant insects were exposed to their corresponding LC50 of Dipel®PM or Xentariobtained through dose-response curves. Hemolymph samples were collected at 1, 6, and 12 h after treatment for total and differential hemocyte counts and quantification of nitric oxide levels. Dipel®PM caused a significant reduction in the total number of hemocytes in the larvae of both populations, while Xentari®WDG affected only the proportion of types of hemocytes. Both formulations interfered with the nitric oxide levels, although no difference was observed between both populations.

In this paper we evaluated the morphologic and quantitative aspects of the implantations sites in uteruses of female pinealectomized and/or submitted to the constant illumination rats. The experimental groups were: I - normal female rats maintained in a clear/dark cycle of 12/12 hours, for two months, mated and euthanasiated in the 6th day of pregnancy (control); II - female sham-pinealectomized rats maintained in a clear/dark cycle of 12/12 hours, for two months, mated and euthanasiated in the 6th day of pregnancy (control); III - female pinealectomized rats, maintained in a clear/dark cycle of 12/12 hours, for two months, mated and euthanasiated in the 6th day of pregnancy; IV - normal female rats maintained in constant illumination for two months, mated and euthanasiated in the 6th day of pregnancy; V - female sham-pinealectomized rats, maintained in constant illumination for two months, mated and euthanasiated in the 6th day of pregnancy; VI - female pinealectomized rats, maintained in constant illumination for two months, mated and euthanasiated in the 6th day of pregnancy. The means of the implantations sites showed that there were significant differences, where the groups III, IV, V and VI differed from the groups II and I, which presented the highest means. The groups III, IV, V and VI didn't differ amongst themselves. The sites in the control groups revealed the presence of small gaps containing blood, trophoblastic cells, and some polyploid cytotrophoblasts. In the groups III, IV, V and VI it was evidenced well-developed gaps at the sites, with trophoblasts, cytotrophoblasts with high polyploidy degree and syncytiotrophoblasts. In conclusion the pinealectomy and/or constant illumination reduce of the number implants in female rats besides to stimulate the development of the implantation sites, indicating thus a probable function of the melatonin in the viability of implantation of the blastocyst

En este trabajo evaluamos los aspectos morfológicos y cuantitativos de los sitios de implantaciones en úteros de ratas pinealectomizadas y/o sometidas a iluminación constante. Los grupos experimentales fueron: I ratas normales mantenidas en ciclo claro / oscuro de 12/12 horas, durante dos meses, cruzadas y sacrificadass en el 60 día de preñez (control); II ratas sham-pinealectomizadas mantenidas en ciclo claro/oscuro de 12/12 horas, durante dos meses, cruzadas y sacrificadas en el 60 día de preñez (control); III ratas pinealectomizadas mantenidas en ciclo claro/oscuro de 12/12 horas, durante dos meses, cruzadas y sacrificadas en el 60 día de preñez; IV ratas normales mantenidas en constante iluminación durante dos meses acasaladas y sacrificadas en el 60 día de preñez; V ratas sham-pinealectomiazadas mantenidas en constante iluminación durante dos meses, cruzadas y sacrificadas en el 60 día de preñez; VI ratas pinealectomizadas, mantenidas en constante iluminación durante dos meses, cruzadas y sacrificadas en el 60 día de preñez. El análisis estadístico de las medias de los sitios de implantaciones mostró que hubo diferencia significativa, donde los grupos III, IV, V y VI diferían de los grupos I y II, los cuales presentaron las mayores medias. Los grupos III, IV, V y VI no son diferentes entre sí. El análisis morfológico de los sitios en los grupos controles reveló la presencia de pequeñas lagunas conteniendo sangre, además de células trofoblásticas y algunos citrofoblastos poliploides. En los grupos III, IV, V y VI se evidenció lagunas muy desarrolladas en los sitios, con trofoblastos, citrofoblastos con alto grado de poliploidia y sinciciotrofoblastos. Concluimos que la pinealectomía y/o constante iluminación llevan a una reducción del número de blastocistos implantados en ratas, además estimula el desarrollo de los sitios de implantación, indicando así; que la melatonina puede tener importante función en la viabilidad de implantación del blastocisto

The present study had the objective of analyzing morphometrically the occupied area by the ovarian follicles in ovaries of pinealectomized female rats. To do so, 24 albino female rats (Rattus norvegicus albinus) were used, which were equally divided in the following groups: Group I sham-pinealectomized rats and kept in the light/dark cycle (12/12 hours), for three months; Group II pinealectomized rats and kept in the light/dark cycle (12/12 hours), for three months; Group III pinealectomized rats and kept in the absence of light for three months; Group IV sham-pinealectomized rats and kept in the absence of rats for three months. The results showed that the groups I and IV presented, respectively, average of 19,00 and 25,00, while groups II and III presented the highest average, 28,25 and 27,25, respectively, indicating, this way, a bigger occupied area by the follicles. It was observed a small amount of corpus luteum in the pinealectomized groups. So, we conclude that the pinealectomy can exert, in a certain period of time, some influence in the gonadal function, what might induce the formation of an anovulatory clinical patology and consequently the development of policystic ovaries

El estudio tuvo como objetivo analizar morfométricamente el área ocupada por los folículos ováricos en ovarios de ratas pinealectomizadas. Para ello, 24 ratas albinas (Rattus norvegicus albinus), fueron divididas igualmente en los siguientes grupos: Grupo I - Ratas falsamente pinealectomizadas y mantenidas en el ciclo claro/oscuro (12/12 horas), por tres meses; Grupo II - ratas pinealectomizadas y mantenidas en el ciclo claro/oscuro (12/12 horas), por tres meses; Grupo III - ratas pinealectomizadas y mantenidas en la ausencia de luz durante tres meses; Grupo IV ratas falsamente pinealectomizadas, y mantenidas en la ausencia de luz por tres meses. Los resultados mostraron que los grupos I y IV presentaban, respectivamente, medias de 19,00 y 25,00, mientras que los grupos II y III presentaron las mayores medias, 28,25 y 27,25, respectivamente, indicando mayor área ocupada por los folículos. Fue observada una pequeña cantidad de cuerpos lúteos en los grupos pinealectomizados. De esta manera, concluimos que la pinealectomía puede ejercer, con el tiempo, alguna influencia en la función gonadal, lo que podrá inducir la formación de un cuadro clínico anovulatorio, y consecuentemente, el desarrollo de ovarios policísticos

Some studies have shown that pinealectomized female rats present a large concentration of collagen fibers in the endometrium. The lack of light results in morphologic alterations in the uterine lamina propria and in the muscular layer, reducing thus the uterine weight. Therefore, this work aimed to analyze ultra-structurally the influence of melatonin in the remodeling of the collagen in the endometrium, in the estrus phase, in pinealectomized adult rats or submitted to lack of light. The experimental groups: I- sham-pinealectomized maintained in a clear/dark cycle 12/12 hours, during three months; II- pinealectomized rats maintained in a clear/dark cycle 12/12 hours, for three months; III- normal rats maintained in clear/dark cycle 12/12 hours for three months; IV- normal rats maintained in lack of light, for three months. Fragments of a third of uterus average were gathered, fixed in Karnowsky solution and processed for Transmission Electron Microscope analysis. The results showed that the animals of the group II presented greater incidence of the estrus phase, in a percentile of 60%, and reduction of the proestrus phase. In the groups I, III and IV it had an equivalence of the estrus phase, however the animals of group IV showed a greater incidence of the diestrus phase with an average percentile of 40%. The ultra-structural analysis of the lamina propria of the endometrium in the animals of the groups I and III revealed several fibroblasts with nucleus presenting a little dense chromatin, and cytoplasm contents a great quantity of rugous endoplasmic reticulum. In the animals of the group II was observed a great quantity of fibroblasts, with several developed rugous endoplasmic reticulum, in spite of the great quantity of collagen fibers. In the animals of group IV themselves, few fibroblasts with small quantity of cytoplam that presents a scarce profile of rugous endoplasmic reticulum. Therefore, one can conclude that melatonin may perform a regulator factor in the collagen fibers synthesis by fibroblasts

Algunos estudios han demostrado que ratas pinealectomizadas presentan gran concentración de fibras colágenas en el endometrio. La ausencia de luz resulta en alteraciones morfológicas en la lámina propia y capa muscular del útero, reduciendo el peso uterino. El objetivo de este trabajo fue analizar ultra-estructuramente la influencia de la melatonina en la remodelación del colágeno en el endometrio, en la fase de estro, en ratas adultas pinealectomizadas o sometidas a la ausencia de luz. Los grupos experimentales fueron: I ratas Sham-pinealectomizadas mantenidas en ciclo luz/oscuridad 12/12 horas, por tres meses; II ratas pinealectomizadas mantenidas en ciclo luz/oscuridad 12/12 horas, por tres meses; III ratas normales mantenidas en ciclo luz/oscuridad 12/12 horas por tres meses; IV ratas normales mantenidas en ausencia de luz, por tres meses. Se tomaron fragmentos del tercio medio del útero, fijados en solución de Karnowsky y procesados para análisis en microscopía electrónica de transmisión. Los resultados fueron: los animales del grupo II presentaron mayor incidencia de la fase de estro, con porcentaje de 60% y reducción de la fase de proestro al 4%. En los grupos I, III, y IV hubo una equivalencia de la fase de estro, sin embargo, los animales del grupo IV mostraron mayor incidencia de la fase de diestro con porcentaje alrededor de 40%. El análisis ultra-estructural de la lámina propia del endometrio de los animales de los grupos I y III reveló fibroblastos con núcleo con cromatina poco densa, y en el citoplasma gran cantidad de retículo endoplasmático rugoso. En los animales del grupo II, fue observada la presencia de gran cantidad de fibroblastos con numerosos retículos endoplasmáticos rugosos bastantes desarrollados, además de gran cantidad de fibras colágenas. En los animales del grupo IV, se observó pocos fibroblastos con escaso citoplasma y poca cantidad de retículo endoplasmático rugoso. Podemos concluir que la melatonina desempeña una actividad en la síntesis de fibras colágenas por los fibroblastos

SUMMARY: In this paper, it was analyzed morphologically the endometrium of pinealectomized rats, treated or not with melatonin, besides luteinizing hormones levels (LH), stimulating follicle (FSH) and prolactin (PRL). The experimental groups were: I normal rats, during three months; II normal rats, during six months; III pinelalectomized rats evaluated after three months; IV pinealectomized rats treated with melatonin for three months; V pinealectomized rats evaluated after six months; VI pinealectomized rats for three months, and after treated with melatonin for more three months. In the animals from groups III and V, the estrous ciclicity was modified, because beyond the increase in the incidence of the estrus phase, some animals developed a persistent estrus condition. In the other groups the estrous cycle was normal. The hormonal dosage showed that there was an increase in the LH levels in groups III and V, and a small reduction in group IV. There weren't changes between groups VI and II. The levels of FSH and PRL showed themselves reduced in all animals from the pinealectomized group. However, these results didn't show statistically meaningful differences. In groups III, V and VI the endometrium presented a normal aspect except by the presence of several endometrial glands, in most cases, dilated. In the animals that developed persistent estrus, it was observed a very fibrous stroma and rare endometrial glands, some of them presenting non-keratinazed pavement stratified epithelium. The animals in group IV showed a similar endometrium to the control groups. It was concluded that the pinealectomy can draw to the condition of persistent estrus, not producing great variation in the serumal levels of the gonadotrophic hormones, and inducing more effective changes in the glandular epithelium

En este trabajo evaluamos morfológicamente el endometrio de ratas pinealectomizadas, tratadas o no con melatonina, además fueron medidos los niveles de los hormonas luteinizante (LH), folículo estimulante (FSH) y prolactina (PRL). Los grupos experimentales fueron: I. Ratas normales tratadas con melatonina durante tres meses; II. Ratas normales, con seis meses de tramiento; III. Ratas pinealectomizadas y evaluadas después de tres meses; IV. Ratas pinealectomizadas y tratadas con melatonina por tres meses; V: Ratas pinealectomizadas y evaluadas después de seis meses de tratamiento; VI. Ratas pinealectomizadas después de transcurridos tres meses tratadas con melatonina por otros tres meses. En los animales de los grupos III y V, la ciclicidad estral fue alterada, pues además del aumento en la incidencia de la fase de estro, algunos animales desarrollaron la condición de estro permanente. En los demás grupos el ciclo estral fue normal. Las dosis hormonales mostraron que hubo un aumento en los niveles del LH en los grupos III y V, y una pequeña reducción en el grupo IV. No hubo alteración entre los grupos II y VI . Los niveles del FSH y PRL se mostraron reducidos en todos los animales de los grupos pinealectomizados. Estos resultados no muestran diferencias estadísticamente significativas. En los grupos III, V y VI el endometrio presentó aspecto normal, excepto por la presencia de innumerables glándulas endometriales, en su mayoría dilatadas. En los animales que desarrollaron estro permanente, se observó estroma bastante fibroso y glándulas endometriais escazas, algunas presentaron epitelio estratificado pavimentoso no queratinizado. Los animales del grupo IV, mostraron el endometrio semejante al de los grupos controles. Concluimos que la pinealectomía puede llevar a condición de estro permanente, no pruduciendo grandes variaciones en los niveles séricos de las hormonas gonadotróficas e induciendo modificaciones más efectivas en el epitelio glandular